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福臨分享標(biāo)準(zhǔn)PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)原則
PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。此項(xiàng)技術(shù)可迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量,給臨床提供了可靠的依據(jù)。
標(biāo)準(zhǔn)PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)原則:
(一)標(biāo)準(zhǔn)PCR實(shí)驗(yàn)室的工作區(qū)
(1)試劑準(zhǔn)備區(qū)
設(shè)置有實(shí)驗(yàn)桌、柜子、冰箱、可移動(dòng)紫外燈、與標(biāo)本制備區(qū)連通的傳遞窗和椅子,在實(shí)驗(yàn)桌上可放置實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備(包括離心機(jī)、震蕩器、移液器、離心管、廢液缸和垃圾筒等)。
(2)標(biāo)本制備區(qū)
設(shè)置有實(shí)驗(yàn)桌、冰箱、生物安全柜、可移動(dòng)紫外燈、水槽和椅子,在實(shí)驗(yàn)桌上和生物安全柜內(nèi)還放置有實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備(包括離心機(jī)、恒溫金屬浴、移液器、離心管、廢液缸和垃圾筒等)。
(3)PCR擴(kuò)增區(qū)
設(shè)置有實(shí)驗(yàn)桌、柜子、與標(biāo)本制備區(qū)連通的傳遞窗和椅子,在實(shí)驗(yàn)桌上放置有實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備(包括定量PCR擴(kuò)增儀、電腦、打印機(jī)、廢液缸和垃圾筒等)。前面設(shè)置有專用走廊,走廊的一側(cè)是各實(shí)驗(yàn)區(qū)的緩沖區(qū)。三間實(shí)驗(yàn)區(qū)的布置依次為試劑準(zhǔn)備區(qū),標(biāo)本制備區(qū)以及PCR擴(kuò)增區(qū)。
(二)標(biāo)準(zhǔn)PCR實(shí)驗(yàn)室各工作區(qū)之間注意事項(xiàng)
(1)各工作區(qū)必須有明確的標(biāo)記,避免不同工作區(qū)域內(nèi)的設(shè)備、物品濫用。
(2)進(jìn)入各工作區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行,即:試劑準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→PCR擴(kuò)增區(qū)。
(3)不同的工作區(qū)域使用不同的工作服,工作人員離開各工作區(qū)域時(shí),不得將工作服帶出。
(三)氣流方向設(shè)置
(1)為了防止環(huán)境對擴(kuò)增產(chǎn)物的影響,按臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室調(diào)協(xié)要求,各實(shí)驗(yàn)區(qū)的氣流設(shè)置方向?yàn)椋嚎諝庥稍噭?zhǔn)備區(qū)流向緩沖區(qū)Ⅰ,標(biāo)本制備區(qū)流向緩沖區(qū)Ⅱ,緩沖區(qū)Ⅲ流向PCR擴(kuò)增區(qū)(如圖3所示)。
(2)工作時(shí),應(yīng)使緩沖區(qū)Ⅰ、緩沖區(qū)Ⅱ和PCR擴(kuò)增區(qū)為負(fù)壓,其它各室為“0”壓或“+”壓。可打開緩沖區(qū)Ⅰ,緩沖區(qū)Ⅱ和PCR擴(kuò)增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣,并且在實(shí)驗(yàn)區(qū)的外墻上各扇門上都安裝有風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口,空氣通過回風(fēng)口向室內(nèi)換氣。
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